樱花基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化  被引量:5

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作  者:陈芳[1] 周春玲[1] 韩德铎[2] 

机构地区:[1]莱阳农学院环境艺术学院,山东青岛266109 [2]聊城大学历史文化学院,山东聊城252059

出  处:《江苏农业科学》2007年第2期85-88,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基  金:莱阳农学院博士启动基金项目(编号:630425)

摘  要:为确保樱花RAPD扩增结果的稳定性和重复性,对Mg^2+、dNTP、引物、模板DNA浓度、Taq酶用量、退火温度,以及PCR循环次数等影响樱花RAPD结果的重要因素进行了初步探索。试验表明,樱花RAPD扩增最适反应体系为20μl反应液中:1×PCR buffer,2.5 mmol/L MgCl2,0.15 mmol/L dNTP,1 UTaq酶,0.2μmol/L 10bp随机引物,20-30 ng模板DNA。最佳扩增程序为:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,38℃退火30 s,72℃延伸2 min,循环40次,最后72℃延伸10 min,12℃保存。

关 键 词:樱花 RAPD 反应体系 优化 

分 类 号:S685.99[农业科学—观赏园艺]

 

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