水稻土总微生物RAPD扩增条件的优化  

作　　者：余彬彬[1] 李钧敏[1] 金则新[1] 

机构地区：[1]台州学院生态研究所,浙江临海317000

出　　处：《江苏农业科学》2007年第2期200-202,共3页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：浙江省教育厅高校科研计划资助项目(编号:20050058)

摘　　要：以改进的CTAB-溶菌酶-蛋白酶K裂解法抽提水稻土总微生物DNA,直接进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析。采用单因素试验分别测试了Mg2+浓度、4×dNTP浓度、模板DNA用量、引物用量、TaqDNA聚合酶用量及牛血清白蛋白(BSA)浓度对水稻土总微生物RAPD扩增的影响,确定了最适的RAPD反应体系为:10μlPCR反应体积,含1×Taq酶缓冲液(10 mmol Tris-HC l pH值9.0,50 mmol KC l,0.1%Triton X-100),0.8mmol/L 4×dNTP,5.0 mmol/L MgC l2,0.75 UTaqDNA聚合酶,3 mg/m l BSA,5 ng模板DNA,5 pmol引物。

关 键 词：水稻土 微生物 RAPD 优化 

分 类 号：S154.3[农业科学—土壤学]