人骨髓间充质干细胞体外纯化及心肌样细胞定向诱导分化后的特征分析  

作　　者：马健[1] 唐海沁[1] 翟志敏[2] 朱薇波[2] 李结华[1] 

机构地区：[1]安徽医科大学第一附属医院老年心血管科,安徽合肥230022 [2]安徽省立医院中心实验室及血液科

出　　处：《中国老年学杂志》2007年第9期817-820,共4页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：安徽省自然科学基金项目(070413101);安徽省教育厅自然科学研究重点项目(2006KJ093A)

摘　　要：目的在体外将人骨髓间充质干细胞(hMSCs)进行纯化、扩增及向心肌样细胞定向诱导分化,并对诱导后的细胞进行心肌样细胞相关特性分析。方法采用体外纯化、扩增后的第4代hMSCs在体外经5μmol/L5-杂氮胞苷诱导24h后继续培养8w,相差显微镜下观察细胞形态变化,免疫组化方法鉴定心肌特异性蛋白心房钠尿肽(ANP)和连接蛋白(CX43)的表达,流式细胞仪检测诱导前后细胞表面抗原(CD31、CD34、CD45、CD90)的表达情况,应用RT-PCR技术分析肌球蛋白重链(β-MHC)和肌钙蛋白T(cTnT)等相关基因在分化过程中的动态表达。结果hMSCs诱导前为纺锤形,诱导后第2天部分细胞即开始发生形变,呈球形或短棒状,1w后胞浆中颗粒增多,约20%～30%细胞呈毛表达呈弱阳性,诱导后明显增高(P<0.05);ANP和CX43在诱导前无表达,诱导后第2周开始表达且表达随时间逐渐增强,但CX43在诱导后第5周表达量开始降低。β-MHC和CTNT基因分别在诱导后第1周和第4周时表达开始增强,在第6周时均达到高峰,第8周时表达开始衰减。结论hMSCs在体外经纯化、扩增和诱导后可表现心肌样细胞的生物学特性,可为hMSCs临床移植治疗提供可靠、安全的细胞来源。

关 键 词：骨髓间充质干细胞 诱导 分化 心肌样细胞 

分 类 号：R541.4[医药卫生—心血管疾病]