cox-2 siRNA表达载体的构建及在HuH-7细胞中的表达  

作　　者：赵清涛[1,2] 岳树强[1] 崔欣[3] 崔忠[4] 张利辉[4] 窦科峰[1] 

机构地区：[1]第四军医大学西京医院肝胆外科 [2]解放军白求恩国际和平医院肝胆外科,河北石家庄050082 [3]解放军白求恩国际和平医院干部病房 [4]解放军白求恩国际和平医院肝胆外科

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2007年第5期479-481,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

摘　　要：目的构建COX-2 siRNA特异性表达载体,观察其对HuH-7细胞中COX-2表达及产生PGE2的影响。方法基于人COX-2基因核苷酸序列,软件分析并选择两靶序列,设计合成发夹结构形成单位,然后将其克隆入pSIREN-Shuttle载体。重组质粒用于瞬时或稳定转染HuH-7细胞,RT-PCR、Western blot用于检测Cox-2的表达,并测定转染前后PEG2的浓度。结果合成的COX-2 siRNA表达载体瞬时转染HuH-7细胞后在mRNA及蛋白水平明显抑制COX-2的表达,稳定转染后则完全阻抑Cox-2的表达,并能抑制PEG2的生成。结论构建的Cox-2 siRNA表达载体具有高效的基因抑制效率,为研究COX-2基因功能及基因治疗提供良好的工具及手段。

关 键 词：肝肿瘤 RNA干扰 环氧化酶-2 基因表达 PEG2 

分 类 号：Q782[生物学—分子生物学]