人肾小管上皮细胞血清饥饿法同步化方法的研究  

作　　者：何丽洁[1] 王汉民[1] 杨桂涛[2] 陈光磊[1] 陈威[1] 杨东[3] 刘宏宝[1] 白淑蓉[1] 沈青[1] 

机构地区：[1]第四军医大学西京医院肾脏内科,陕西西安710032 [2]第四军医大学西京医院医教部,陕西西安710032 [3]第四军医大学西京医院中医科,陕西西安710032

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2007年第3期275-276,285,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30470802)

摘　　要：目的:探讨采用血清饥饿法建立将人肾小管上皮细胞(HKC)的同步化方法。方法:将HKC分为6个不同低血清浓度组及对照组,分别采用胎牛血清浓度为0、1、2、3、4、5和100 mL/L的DMEM培养液培养24 h。根据流式细胞术结果选择的最佳同步化HKC的胎牛血清浓度。将HKC的同步化处理时间分别延长为24 h、48 h和72 h,选择最佳同步化时间。用MTT法绘制生长曲线观察血清饥饿处理对HKC生长的影响。采用免疫细胞化学方法验证血清饥饿同步化处理HKC的效果。结果:选择无血清(0 mL/L)和1 mL/L为HKC最佳同步化的胎牛血清浓度,选择48 h为HKC同步化最佳时间。细胞生长曲线表明采用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h后恢复正常培养的HKC细胞,其生长曲线更接近于正常培养的细胞。Brdu进一步证明,用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h可以使90%以上的HKC细胞处于G0/G1期。结论:用1 mL/L胎牛血清的DMEM培养液培养48 h可获得90%以上的G0/G1期HKC。

关 键 词：肾小管上皮细胞 同步化 血清饥饿法 G0/G1阻滞 

分 类 号：Q253[生物学—细胞生物学]