重构猪SLA-I单链复合体及其口蹄疫病毒VP1蛋白限制性表位的筛选  

作　　者：高凤山[1] 姜平[1] 方青美[2] 李云岗[2] 李新生[2] 王钦富[1] 迟彦[1] 夏春[2] 

机构地区：[1]大连大学生物工程学院生物有机化学重点实验室,大连116622 [2]中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室,北京100094

出　　处：《自然科学进展》2007年第6期724-730,共7页

基　　金：国家自然科学基金资助项目(批准号:30371098)

摘　　要：目前,没有研究猪SLA-I类复合体限制性表位的系统.为了构建猪的SLA-I类复合体,研究其相应重要病毒的限制性表位,亚克隆猪主要组织相容性复合体重链基因SLA-2胞外区和轻链基因β2m成熟肽区,利用一富含甘氨酸和丝氨酸的Linker(G4S)3连接两个基因,通过SOEPCR体外构建了猪可溶性的单链复合体SC-SLA-I[SLA-2-(G4S)3-β2m],计算机方法设计3类口蹄疫病毒VP1蛋白的T细胞表位,经化学合成,分别命名为PepⅠ(FMDV/VP126—34)、PepⅡ(FMDV/VP1157—165)和PepⅢ(FMDV/VP145—53),用以结合单链复合体蛋白SC-SLA-I.酸洗脱结合质谱法测定SC-SLA-I结合表位,同时设定非相关蛋白和多肽的对照试验.结果显示,Pep Ⅰ和Pep Ⅱ均能和SC-SLA-I结合,而Pep Ⅲ及非相关多肽不能结合,对照蛋白MBP的肽结合试验显示阴性.结果表明,多肽Pep Ⅰ和Pep Ⅱ属于SLA-I类限制性表位.

关 键 词：SLA-I单链复合体 T细胞表位 口蹄疫病毒 

分 类 号：S813[农业科学—畜牧学]