单精注射法生产转GFP基因猪胚胎的研究  

Production of Porcine Transgenic Embryos Expressing GFP by Intracytoplasmic Sperm Injection(ICSI)

作　　者：苗向阳[1] 方昌阁[1] 邵建军[1] 朱瑞良[2] 任慧英[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100094 [2]山东农业大学动物科技学院,泰安271018

出　　处：《中国畜牧兽医》2007年第6期44-46,共3页China Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：中国农业科学院院长基金及创新基金资助项目(9725-16)

摘　　要：卵胞质内单精子注射(ICSI)的出现为治疗人类男性不育提供了新的途径。作为一种家畜胚胎工程新技术,ICSI可以解决猪的多精子受精问题。本研究用冷冻/解冻的猪精子与GFP基因孵育后对猪IVM卵母细胞进行ICSI,通过对猪ICSI卵母细胞发育能力和基因表达效率的分析,初步研究以精子为载体的转基因与卵细胞质内单精注射相结合的技术(SMGT-ICSI)生产转基因猪胚胎的技术路线的可行性。用GFP基因转染的精子注射后化学激活的ICSI卵母细胞基因表达率显著高于电激活处理的ICSI卵母细胞的基因表达率。用精子头部注射的猪卵母细胞和用完整精子注射的猪卵母细胞总基因表达效率无显著差异(P>0.05)。结果表明,用冷冻/解冻后的猪精子或精子头部与外源DNA孵育后通过ICSI方法生产转基因胚胎是可行的。Intracytoplasmic sperm injection（ICSI）, which is a new technique of embryo engineering of domestic animals, can solve the problem of porcine polyspermy. Porcine ICSI was conducted using repeatedly frozen/thawed intact sperm or sperm head which were incubated with GFP gene for 30 minutes. The expression rate of GFP gene in ICSI oocytes activated by CaCl2 was higher than that of ICSI oocytes activated by electrical pulse. The result showed that SMGT-ICSI procedure for the production of transgenic porcine embryos was feasible.

关 键 词：卵母细胞 单精注射 胚胎 

分 类 号：S814.8[农业科学—畜牧学]