朱鹮RMAPD扩增体系的正交试验优化  

Orthogonal experiment optimization of RMAPD in crested ibis

作　　者：张永德[1] 范光丽[1] 雷初朝[1] 常秀云[2] 张军凤[2] 陈宏[1] 

机构地区：[1]西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100 [2]陕西省林业厅,陕西西安710000

出　　处：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2007年第7期28-32,共5页Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition)

基　　金：国家自然科学基金项目(No3007093);陕西省自然科学基金项目(No2001SM14);陕西省林业厅野生动物救护基金项目

摘　　要：采用正交试验设计,从Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP、微卫星引物和随机引物浓度等方面对朱鹮RMAPD扩增体系进行了优化。结果表明,朱鹮RMAPD扩增的最佳体系为:10×Buffer 2.0μL,MgCl23.13 mmol/L,TaqDNA聚合酶1 U,dNTP 0.10 mmol/L,微卫星引物0.20μmol/L,随机引物0.50μmol/L,模板DNA 3.75 mg/L,最后补ddH2O至20μL。将该体系用于朱鹮RMAPD分析,得到了重复性和稳定性良好的朱鹮RMAPD试验结果。L16 （4^5） orthogonal experiment design was performed with 5 factors of the concentration of Mg^2＋ ,Taq DNA polymerase,dNTP and primers for the RMAPD reaction system in crested ibis. The results indicated that the RMAPD reaction system in crested ibis was 10× Buffer 2. 0 μL, MgCl2 3. 13 mmol/L, Taq DNA polymerase 1 U,dNTP 0.10 mmol/L,microsatellite primer 0.20 μmol/L,random primer 0.50 μmol/L,template DNA 3.75 mg/L,and adding ddH2O to 20μL. Results of RMAPD in crested ibis with good repeatability and stability were obtained by using the optimized reaction system.

关 键 词：朱鹮 RMAPD 扩增体系 正交试验设计 

分 类 号：S818.9[农业科学—畜牧学]