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作 者:宁康[1,2] 范洪学[3] 李熔[1] 叶棋浓[1]
机构地区:[1]军事医学科学院生物工程研究所 [2]吉林大学公共卫生学院,吉林长春130021 [3]吉林大学公共卫生学院
出 处:《生物技术通讯》2007年第1期12-14,共3页Letters in Biotechnology
基 金:国家自然科学基金项目(30530320;30370738;30428012)
摘 要:目的:检测MDM2基因对雌激素受体α和β(ERα和ERβ)是否具有转录活性调节作用。方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增MDM2序列,并将其以正确相位与pcDNA3-FLAG载体中的FLAG序列融合,构建成重组质粒pcDNA3-FLAG-MDM2;以含雌激素反应元件的荧光素酶(ERE-LUC)为报告基因,通过检测荧光素酶活性来确定MDM2是否对ER有转录调节因子的作用。结果:克隆和表达了MDM2基因;MDM2只对ERα具有转录活性调节作用。结论:MDM2对ER转录活性的调节具有亚型特异性。Objective: To detect if MDM2 can regulate the transcriptional activity of estrogen receptor α and β(ERα and ERβ). Methods: The sequence of MDM2 was amplified by PCR and fused in frame with the region of FLAG in the pcDNA3-FLAG vector to generate the pcDNA3-FLAG-MDM2 recombinant plasmid. The effect of MDM2 on the transcriptional activity of ER was detected by the reporter gene containing estrogen responsive elements luciferase(ERE-LUC). Resuits: MDM2 enhanced only the transcriptional activity of ERα. Conclusion: The transcriptional regulation of ER by MDM2 is ER subtype-specific.
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