地高辛标记cDNA探针检测猪繁殖与呼吸综合征病毒  

作　　者：李广明[1] 姜平[1] 李玉峰[1] 秦承学[1] 

机构地区：[1]南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210095

出　　处：《畜牧与兽医》2007年第5期43-45,共3页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金(30471288;30270990);新世纪优秀人才项目(NCET-04-0502);教育部博士点基金项目(2003030712)

摘　　要：本研究以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S1株ORF7基因为模板,通过RT-PCR技术扩增出394 bp的cDNA。用PCR纯化试剂盒纯化PCR产物,并以此为模板制备出地高辛标记的cDNA探针。特异性试验表明,该探针仅与PRRSV核酸反应,与PPV、PRV、FMDV、HCV及PCV2的核酸反应为阴性。敏感性检测表明,采用CSPD化学发光检测时,硝酸纤维素膜上最低检出量为62.5 pg;尼龙膜上最低检出量为0.5 pg。应用该探针,在尼龙膜上对10份PRRSV阳性病料的组织RNA样品进行检测,结果均为阳性,与RT-PCR检测结果一致,证明该方法可用于PRRSV临床样品检测。

关 键 词：地高辛标记 探针 斑点杂交 化学发光 猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒 

分 类 号：S858.285.2[农业科学—临床兽医学]