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作 者:李欣峰[1] 徐勤[2] 魏东芝[1] 沈亚领[1] 苏勇[1]
机构地区:[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237 [2]湖北轻工职业技术学院轻化工系,武汉430070
出 处:《工业微生物》2007年第4期31-35,共5页Industrial Microbiology
摘 要:D-氨基酸氧化酶是两步酶法制备7-氨基头孢烷酸(7-ACA)这一半合成头孢类抗生素的主要前体的关键酶。它催化的反应是需氧反应,反应体系的溶氧水平是酶活的限制因素之一。我们发现将纯化的透明颤菌血红蛋白(VHb)分别添加到三角酵母来源(TvDAO)和红酵母来源(RgDAO)的D-氨基酸氧化酶的纯酶中,可提高这两种氧化酶的活力35%和48%。细菌双杂交实验证明,透明颤菌血红蛋白与RgDAO有相互作用,而与TvDAO没有关联。这说明透明颤菌血红蛋白对氧化酶活力的促进是由于自身向氧化酶提供游离氧,而且它与氧化酶之间的相互作用可以增强这种效果。我们可以利用透明颤菌血红蛋白的这种性质把它作为氧化酶酶促反应的添加剂,提高酶促反应的效率,如果该氧化酶与之有相互作用,效果会更加显著。D-amino acid oxdiase used in synthesizing cephalosporin-like antibiotics is the key enzyme in synthesizing 7- ACA. By adding purified Vitreoscilla hemoglobin (VHb), it was found that the activity of D-amino acid oxidase of Trigonopsis variabilis (TvDAO) and Rhodotorula gracilis (RgDAO) were enhanced by 35 % and 48 % respectively. It was further proved through BacteriolMatch two-hybrid system that VHb interacted with RgDAO but did not do with TvDAO. It could be concluded from the above that VHb effects on the activity of D-amino acid oxidase by providing free oxygen to the enzyme and the interaction between VHb and enzyme could enhance the influence.
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