高灵敏度电化学发光PCR方法检测花椰菜花叶病毒35 S启动子  

Highly Sensitive Electrochemiluminescence-PCR Method for the Detection of CaMV 35 S Promoter

作　　者：朱德斌[1] 邢达[1] 刘晋峰[1] 

机构地区：[1]华南师范大学激光生命科学研究所暨激光生命科学教育部重点实验室,广东广州510631

出　　处：《激光生物学报》2007年第4期485-489,共5页Acta Laser Biology Sinica

基　　金：国家自然科学基金项目(30600128;30670507);广东省自然科学基金项目(015012)

摘　　要：大多数转基因植物中使用花椰菜花叶病毒(cauliflower mosaic virus,CaMV)35 S作为启动子,因此可通过检测该启动子来判断植物样品中是否含有转基因成分。实验将高灵敏度电化学发光PCR方法用于检测转基因烟草中的CaMV35 S启动子,将该启动子的PCR产物与生物素标记的探针杂交,可以起到特异性筛选产物的作用;与发光标记物——三联吡啶钌标记的探针杂交,从而实现电化学发光检测。两种探针同时与待测样品的PCR产物进行杂交,进一步对样品进行特异性筛选,从而提高了检测的准确性,避免了假阳性结果的产生。实验结果表明:该法可以准确的区分待测样品中是否含有35 S启动子,从而区别转基因烟草和非转基因烟草。电化学发光PCR方法灵敏度高,可靠性强,操作简便,结果准确,有望成为一种高效的转基因植物检测方法。Most genetically modified （GM） plants contain cauliflower mosaic virus 35 S （ CaMV 35 S） promoter. So, whether the plants contain GM component can he discriminated by detecting the CaMV 35 S promoter. In this study, the highly sensitive electrochemiluminescence-polymerase chain reaction （ECL-PCR） assay combined with two types of nucleic acid probes hybridization was applied to detect CaMV 35 S promoter in tobaccos. The experiment results show that the CaMV 35 S promoter can only be detected in GM tobaccos, thus, the GM tobaccos and the non-GM tobaccos can be clearly discriminated. The method may provide a new means for the detection of GM plants due to its sensitivity, simplicity and high efficiency.

关 键 词：电化学发光-PCR 花椰菜花叶病毒35S启动子 探针杂交 

分 类 号：Q503[生物学—生物化学] Q78