大肠杆菌hemA基因的高效表达及对5-氨基乙酰丙酸合成的影响  

Studies on high - level expression of hemA gene in Echerichia coli and its influence on the synthesis of 5 - aminolevulinic acid

作　　者：袁新宇[1] 刘锦妮[2] 王晶[2] 杨琼[1] 吴雪珍[1] 姜发堂[1] 杨明明[2] 

机构地区：[1]湖北工业大学生物工程学院 [2]西北农林科技大学动物科技学院

出　　处：《江苏农业科学》2007年第4期260-263,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：武汉市重点科技计划项目(编号:20036003044)

摘　　要：大肠杆菌(Escherichia coli)中的hemA基因编码谷氨酰tRNA还原酶,该酶是E.coli生物合成5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)途径中的限速酶。本试验在pEXT20-hem AE.coliBL21(DE3)表达载体的基础上,从质粒克隆hemA基因克隆到载体,构建表达载体pET28a-hemA,以探讨更佳的重组大肠杆菌hemA基因的表达效果。对其蛋白质进行纯化,测得发酵菌液上清液中5-ALA含量达到42.5 mg/L;并对上清提取液中卟啉类物质的积累量进行初步测定,发现403 nm处吸收峰值明显高于同条件发酵提取pEXT20-hemAE.coliBL21(DE3)重组菌。试验表明,用表达载体可以更好地表达hemA基因。

关 键 词：大肠杆菌 hemA基因 高效表达 5-ALA pET28a 

分 类 号：R378.21[医药卫生—病原生物学]