结核杆菌Ag85A重组蛋白的免疫原性研究  

Investigation of immunogenicity of Ag85A recombinant fusion protein from Mycobacterium tuberculosis

作　　者：周晔[1] 蒋天舒[1] 陈燕[1] 娄加陶[1] 吴传勇[1] 陈波[1] 谷明莉[1] 仲人前[1] 邓安梅[1] 

机构地区：[1]第二军医大学附属二院实验诊断科,上海200003

出　　处：《中国实验诊断学》2007年第9期1153-1155,共3页Chinese Journal of Laboratory Diagnosis

基　　金：国家自然科学基金(30471616);上海市重大科技攻关基金(04DZ19116);上海市重点科研支撑条件项目(051409012);上海市青年科技启明星计划(QMX01423);上海市重点基础研究项目(05JC14052)资助。

摘　　要：目的探讨纯化的结核杆菌Ag85A重组蛋白激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型结核疫苗的设计打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的重组表达Ag85A蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定Ag85A重组蛋白的免疫原性。结果以刺激系数(SI)>3为界,Ag85A重组蛋白(10μΜ)能刺激全部12例HL-A*0201阳性(A2+)结核菌素阳性(PPD+)健康个体的PBMC发生增殖(平均SI为56.2±3.6);增殖反应明显高于PPD(平均SI为13.7±3.5)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在Ag85A重组蛋白诱导的CTL细胞毒活性分析中以负载抗原肽(10μΜ)的T2细胞作为靶细胞,Ag85A重组蛋白诱导的CTL作为效应细胞,Ag85A重组蛋白能诱导全部的12例A2+PPD(+)健康个体中CTL杀伤活性,平均活性分别为(85.2±8.5%),显著高于PPD〔(平均为(21.6±1.7%)〕(P<0.01)诱导的CTL杀伤活性。结论本研究得到的重组优化Ag85A蛋白具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性,为进一步开发有效的结核疫苗打下了基础。Objective To investigate immunogenicity of Ag85A recombinant fusion protein from Mtb. Melhods Cellular proliferation and cytotoxicity experiments were evaluate the immunogenicity of recombinant Ag85A recombinant fusion protein from Mtb. Resuits Ag85A recombinant fusion protein （ 10μM） can stim＆ate proliferation in PBMC from all of 10 IKA-A^＊0201 positive （A2 ＋ ） PPD ＋ healthy candidates, stikingly stronger than those of single peptide＇ and PPD＇ groups （average stim＆ation index as 56.2 ± 3.6 versus 13.7 ± 3.5 respectively, P 〈 0.01 ）. CrLs induced by Ag85A recombinant fusion protein were used as effector cells in a CTL assay against T2 cells loaded with PPD.Ag85A recombinant fusion protein can induce CTL cytotoxity activity in all of 12 A2 ＋ PPD＋ healthy candidates, significantly higher than PPD＇ s groups（ average activity as 85.2 ± 8.5 % versus 21.6 ± 1.7 % , respectively, P 〈 0.01）. Conclusion The recombinant Ag85A fusion protein from Mtb. could stimulate greater proliferation and cytotoxicity of PBMC, which is helpful for designing new vaccine.

关 键 词：结核分支杆菌 Ag85A重组蛋白 疫苗 

分 类 号：R392[医药卫生—免疫学]