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机构地区:[1]平原大学应用生物系分子生物学实验室,新乡453003 [2]河南科技学院生物工程系分子生物学重点实验室,新乡453003
出 处:《植物学通报》2007年第5期609-613,共5页Chinese Bulletin of Botany
基 金:福建省科技计划项目(No.JY-03-B-30-20)
摘 要:以3-5天苗龄的散叶大速生生菜(Lactucasativavar.capatata)无菌苗子叶为外植体,通过根癌农杆菌介导,将携带O型和A型口蹄疫抗原决定簇融合基因O21-O14-A21-HBcAg导入生菜。研究结果表明,含有20mg.L-1潮霉素(Hyg)的S2培养基(MS+1.5mg.L-16-BA+0.2mg.L-1IAA+20mg.L-1Hyg+300mg.L-1Cb)为子叶外植体转化后诱导愈伤和芽再生的最适培养基,经抗性筛选,将抗性芽切下于S3培养基(1/2MS+20mg.L-1Hyg)上诱导生根。通过PCR和Southern杂交分析证明,基因已经整合到生菜基因组中。RT-PCR检测初步表明,O21-O14-A21-HBcAg基因可以在生菜中正常转录。The FMD antigenic-determinant fused gene (021-014 -A21-HbcAg) was introduced into lettuce (Lactuca sativa var. capatata) by co-culturing excised cotyledon explants with Agrobacterium tumefaciens. The best transformation efficiency was obtained on co-culture with the selective medium S2 (MS + 1.5 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 IAA + 500 mg·L^-1 Cb) containing 20 mg·L^-1hygromycin. Roots were induced on S3 (1/2 MS + 20 mg·L^-1Hyg). Integration of FMD antigenic-determinant fused gene O21-O14 -A21-HBcAg into the genome of lettuce plants was confirmed by PCR and Southern blotting analysis. Expression of the fused gene at the transcriptional level was shown by RT-PCR.
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