中药对口腔细菌生物膜作用的实验研究  

Effects of traditional Chinese medicine on oral bacteria biofilm

作　　者：赵今[1] 李继遥[1] 朱晒[1] 周学东[1] 

机构地区：[1]四川大学口腔生物医学工程教育部重点实验室

出　　处：《中华口腔医学杂志》2007年第10期585-589,共5页Chinese Journal of Stomatology

基　　金：国家自然科学基金(30430800)

摘　　要：目的用五倍子和蜂房的有效成分作为实验药物研究中药对口腔细菌生物膜结构、活性的影响及对生物膜中葡萄糖转移酶(GTF)活性的影响,探讨中药防龋的可能性。方法用荧光显微镜结合特异荧光染料标记口腔细菌生物膜中死菌和活菌的方法,研究实验药物对口腔细菌生物膜结构和活性的影响。硫酸铵沉淀法提取粗酶,Neson-Somogyi 法测定还原糖,G250微量蛋白定量 GTF还原糖计算 GTF 活性单位,评价实验药物对口腔细菌生物膜中 GTF 活性的影响。结果早期细菌定植黏附到形成成熟生物膜结构的过程中都存在一定数量的死菌。24h 常态生物膜结构中活菌面积占主导地位,有少量死菌存在,细菌互相紧密黏附在一起,生物膜结构清晰。0.05%氯己定对24h 细菌生物膜作用后,细菌总量明显下降,残存滞留的细菌基本为死菌。0.023%的 NaF 作用于细菌生物膜后,生物膜结构发生明显变化,细菌总量明显减少,存在的细菌以活菌为主。经4g/L 五倍子多酚性化合物(GCE)、五倍子化学组分 B(GCE-B)及32g/L 蜂房化学组分1(NVE1)作用后,生物膜结构模糊不清,细菌散开,生物膜结构密度下降,其中死菌和活菌量基本相同。生物膜细菌总量减少,与24h 常态生物膜相比,差异有统计学意义(P<0.05)。各实验组活菌百分比与阴性对照组活菌百分比相比差异有统计学意义(P<0.05)。24h 口腔细菌生物膜经4 g/L GCE 以及32 g/L NVE1作用后,GTF 的活性受到明显抑制,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。GCE-B 在实验浓度下对 GTF 的活性未产生明显的抑制作用。结论五倍子和蜂房有效成分组成的实验药物对口腔细菌生物膜的抑制作用不单纯是对口腔生物膜细菌有杀灭作用,还可能通过对口腔细菌生物膜结构的改变调整其内部的细菌组成及抑制细菌生物膜中 GTF 活性而发挥作用。Objective To investigate the effects of compounds of Galla chinensis extract（GCE） and Nidus vespae extract-1 （WVE1） on oral bacteria biofilm structure and activity and to determine the possibility of caries prevention by the compounds. Methods The morphology and activity of treated-oral bacterial biofilm and untreated-oral bacterial biofilm were abserved by using fluorescence microscope in combination of idio-fluorochrome to label the died and living bacteria. The visible light semiquantitative method was used to measure biomass glucosyltransferase（ GTF,A620 ） values and to determine the effects of active compounds of GCE and NVE1 on GTF of oral bacteria biofilm. Results The living bacteria in the untreated 24 h bacterial biofilm was dominant, and only a small number of died bacteria were found, the biofilm structure was regular and clear. GCE, GCE-B and NVE1 could inhibit the bacteria in the dental biofilm, which showed significant difference with the negative control. GCE and NVE1 could also inhibit GTF activity of 24 h bacterial biofilm in comparison with the negative control. Conclusions The traditional Chinese medicine Calla chinensis and Nidus vespae could not only inhibit bacteria growth on oral bacterial biofilm, but also function by adjusting biofilm structure, composition and GTF activity of 24 h bacterial biofilm.

关 键 词：五倍子 蜂房 生物膜 葡糖转移酶类 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]