蛇菰提取物对人PTP1B酶活性的抑制作用  

作　　者：田金英[1] 叶菲[1] 吉腾飞[1] 苏亚伦[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所,北京100050

出　　处：《中国药理通讯》2007年第3期40-40,共1页

摘　　要：目的：胰岛素信号传导系统中的蛋白酪氨酸磷酸酶1B（protein tyrosine phosphatase 1B，PTP1B）是胰岛素增敏剂的新靶点之一。本文旨在制备人PTPlB蛋白，并观察多蕊蛇菰（Balaophora polyandra Griff．）提取物对PTP1B的抑制作用。方法：采用分子生物学方法，以IPTG诱导基因重组的hGST-PTPlB BL21 E．Coli工程菌过表达人类PTP1B蛋白，经GST亲和层析柱纯化得到hGST-PTPlB蛋白质。以Bio-Rad蛋白分析试剂测定蛋白含量。采用体外酶学方法，以多肽para-NitroPhenyl Phosphate（pNPP）为底物，观察药物对hGST-PTPIB酶活性的影响。多蕊蛇菰全草用石油醚加热回流，再经不同浓度的水、乙醇等溶剂提取，减压浓缩后得蛇菰提取物。结果：经hGST-PTPlB-BL2 1E．Coli工程菌扩增、诱导表达、并经GST亲和层析柱纯化，可得到人类hGST-PTPIB蛋白质，平均得率为9．2土2．7mg／L。将该蛋白质产物用7．5％SDS-PAGE电泳，紫外扫描分析在分子量40KD附近有明显的单一条带，为hGST-PTPIB蛋白质。分离多蕊蛇菰全草共得到61个提取物。其中，在体外对PTPlB酶的抑制率〉50％的有21个提取物。对抑制率〉80％的7个活性部位，进一步分析量效关系，其50％抑制率的浓度（IC50）分别为0．566、0．588、0．596、0．616、0．667、0．970、和1．23ug／ml。结论：诱导基因重组的hGST-PTPP1B-BL21 EColi工程菌可得到hGST-PTPP1B蛋白质，不同提取部位的蛇菰提取物对PTP1B酶有显著的抑制作用。

关 键 词：蛋白酪氨酸磷酸酶1B 多蕊蛇菰 胰岛素 酶活性 

分 类 号：R977.15[医药卫生—药品] R977.3[医药卫生—药学]