鼻咽癌NAP1(18～44)融合表达载体的构建、表达纯化及初步研究  

VECTOR CONSTRUCTION,PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION OF NAP1(18～44)

作　　者：罗权[1] 邓志威[1] 王金凤[2] 

机构地区：[1]北京师范大学分析测试中心,北京100875 [2]中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室,北京100101

出　　处：《北京师范大学学报（自然科学版）》2007年第5期538-542,共5页Journal of Beijing Normal University(Natural Science)

摘　　要：通过PCR扩增及定点突变等构建了pET-DsbA/NAP1（18- 44）融合表达载体,将其转化入大肠杆菌BL21后获得可溶表达.通过镍亲和柱,Thrombin酶切及G50分子筛对鼻咽癌NAP1（18- 44）进行了纯化并进行了质谱鉴定.NAP1（18- 44）的圆二色谱和2D1HNMR DQF-COSY谱表明鼻咽癌肽段在TFE溶液中能形成一定的α螺旋.这些工作为进一步用核磁共振技术研究NAP1（18- 44）打下了基础.pET-DsbA/NAP1 （18-44） vector is constructed by PCR and site-directed mutagenesis to express a 29-residue fragment of NAP1 for NMR research. Soluble expression is achieved after transformation to E. coli BL21. The target fragment NAP1 （18-44） is purified by Ni^2＋ affinity chromatography combined with thrombin digestion and G50 gel filtration. The molecular weight of NAP1 （18-44） is identified by MALDI-TOF. CD spectrum as well as 2D ^1HNMR DQF-COSY spectrum of NAP1（18-44） have demonstrated that the fragment has capability to form an a-helix in TFE solution.

关 键 词：鼻咽癌 NAP1 融合表达 NMR 

分 类 号：Q782[生物学—分子生物学]