微分脉冲极谱法研究稀土离子对乳酸脱氢酶活性的影响  被引量:2

The Study of the Effect of Lanthanide Ions on the LDH Activity by Differential pulse Polarography

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作  者:汪勋清[1] 高小霞[1] 

机构地区:[1]北京大学化学与分子工程学院

出  处:《北京大学学报(自然科学版)》1997年第2期147-152,共6页Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Pekinensis

基  金:国家自然科学基金

摘  要:根据前文黄瓜根系伤流液(经La3+,Eu3+处理)中微量La3+,Eu3+明显影响氨基酸代谢的结果,用记时电流法研究了稀土对氮同化过程中硝酸还原酶(NR)和谷氨酸脱氢酶(GDH)活性的影响,酶活性的变化以辅酶NADH氧化电流在反应中的衰减速度来表示。用微分脉冲极谱法研究稀土离子对丙酮酸转化为乳酸反应中乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响,以反应产物NAD+的还原电流的大小表示酶活性的变化。研究结果表明La3+在低浓度(<5μmol/L)下对酶活性有微弱的促进作用,其他稀土离子Ce3+,Eu3+,Dy3+,Yb3+在浓度稍高时(≥5μmol/L)都显示抑制作用。对比光度法的结果以及反应动力学参数Vmax和Km均证明稀土离子对此体系中LDH活性有抑制作用。Differential pulse polarography(DPP) was applied to study the effect of lanthanide ions on the LDH activity in the catalytical reaction of pyruvate+NADH+H +lactate+NAD +, by monitoring DPP reduction current of NAD +. In a buffer solution of 0.05 mol/L Tris HCl(pH7.5)+0.5 mmol/L pyruvate, NAD + exhibits a well defined differential pulse peak at -0.82 V. The peak current is proportional to NAD + concentration in the range 1 ̄28 μmol/L. In the assay mixture, low concentration La 3+ ions(<5 μmol/L) slightly increase LDH activity. Other ions Ce 3+ ,Eu 3+ ,Dy 3+ and Yb 3+ (≥5 μmol/L) show inhibitory effects. The data of spectrophotometry and kinetics analysis are in agreement with DPP results.

关 键 词:稀土离子 活性 微分脉冲极谱法 乳酸脱氢酶 

分 类 号:Q554[生物学—生物化学]

 

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