腺病毒5型knob蛋白的原核表达、纯化及其单克隆抗体的制备  

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作  者:王鹏[1] 王华茂[2] 周敏[2] 刘素霞[2] 林志新[1] 徐宇虹[1] 李宗海[2] 

机构地区:[1]上海交通大学生命科学技术学院 [2]上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室,上海200032

出  处:《细胞与分子免疫学杂志》2007年第11期1038-1040,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基  金:国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2004CB518802)

摘  要:目的:表达、纯化腺病毒5型knob蛋白,并制备其单克隆抗体(mAb)。方法:克隆并表达腺病毒的knob蛋白,其氨基端带有6-His标签。纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb。结果:成功表达了knob蛋白。SDS-PAGE显示所表达蛋白的相对分子质量(Mr)约为23000。获得了2株分泌针对knob的杂交瘤细胞系(8D7和6D4),其分泌的mAb的Ig亚类(型)均为IgG2b。ELISA检测,对应腹水mAb的效价分别为1:2.1×105,1:2.2×105。Western blot结果显示抗knobmAb具有良好的特异性。结论:成功地制备了knob蛋白及其mAb。

关 键 词:knob蛋白 原核表达 单克隆抗体 

分 类 号:R392.11[医药卫生—免疫学]

 

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