小鼠cdc25B蛋白特定序列的克隆及原核表达  

作　　者：崔城[1] 赵鸿梅[2] 王雁[3] 邓欣[4] 于秉治[4] 

机构地区：[1]中国医科大学基础医学院生理学教研室,辽宁沈阳110001 [2]辽宁省人民医院检验科,辽宁沈阳110016 [3]中国医科大学实验技术中心三部,辽宁沈阳110001 [4]中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,辽宁沈阳110001

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2007年第11期1061-1063,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30570945)

摘　　要：目的:构建小鼠cdc25B蛋白特定序列的原核表达载体,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白。方法:采用PCR方法从小鼠cdc25B野生型及位点突变型蛋白编码序列中扩增出约360个碱基的片段,构建原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导后进行融合蛋白表达。Western blot鉴定表达产物。结果:构建出带有GST标签的原核表达载体,在大肠杆菌BL21中表达出相对分子质量(Mr)为40000的重组蛋白质,经Westernblot鉴定,可与GST单克隆抗体结合,发生特异性反应。结论:利用原核表达系统成功表达出小鼠cdc25B蛋白特定序列的蛋白质,为进一步探讨与其他蛋白相互作用提供了基础。

关 键 词：小鼠 CDC25B 原核表达 

分 类 号：Q132.7[生物学—普通生物学]