猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞联合培养体系建立  

作　　者：孙红梅[1] 杨公社[1] 孙超[1] 

机构地区：[1]西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室,陕西杨凌712100

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2007年第7期673-675,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30471267);教育部重点资助项目(105167);学校青年学术骨干支持计划资助(2006年)

摘　　要：目的:探讨猪前体脂肪细胞与肌卫星细胞体外直接联合培养的适宜体系。方法:将分离纯化、鉴定的猪前体脂肪细胞与骨骼肌肌卫星细胞按1:1(Ⅰ组)、1:2(Ⅱ组)、1:4(Ⅲ组)浓度比混合培养,MTT比色绘制2～9d内细胞生长曲线,经倒置显微镜观察第9天细胞生长状态,选取最佳浓度比重复联合培养,通过血细胞板计数测定72h内细胞贴壁率,分析得最佳贴壁时间,并比较不同培养液(M199、DMEM/F12、M199+100mL/LFBS、DMEM/F12+100mL/LFBS、RPMI+100mL/LFBS、DMEM+100mL/LFBS)及血清浓度(10～200mL/LFBS)对细胞贴壁率的影响。结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组细胞生长曲线与形态学观察显示,前体脂肪细胞与肌卫星细胞以1:4浓度比联合培养至9d时,细胞增殖率可达到最大、生长状态优于Ⅰ、Ⅱ组;通过细胞计数发现联合培养细胞贴壁率在48～66h之间趋于稳定,DMEM/F12+100mL/LFBS培养液培养效果显著优于其他培养液(P<0·05);在测定1～100mL/L血清浓度范围内,联合培养细胞贴壁率的升高对血清浓度具有依赖性。结论:使用含100mL/L胎牛血清的DMEM/F12(1:1)培养液,将前体脂肪细胞与肌卫星细胞以1:4浓度比混合接种,在联合培养48h后第1次换液,可保持联合培养细胞良好的贴壁与增殖状态。

关 键 词：联合培养 浓度比 贴壁时间 培养液 血清浓度 

分 类 号：R828[医药卫生—临床医学]