鸡B淋巴细胞cDNA T7噬菌体表达文库的构建与鉴定  

作　　者：张改平[1] 张红[1] 郭军庆[2] 王选年[3] 乔松林[1] 郝慧芳[1] 王丽[1] 

机构地区：[1]河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002 [2]浙江大学,浙江杭州310029 [3]河南科技学院,河南新乡453003

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2007年第12期1186-1188,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金重点资助项目(30230270)

摘　　要：目的:构建鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库并对文库质量进行鉴定。方法:利用oligo(dT)-纤维素亲和层析从SPF雏鸡法氏囊细胞制备mRNA,合成的双链cDNA定向克隆到T7EcoR I/HindIII载体臂,包装并构建cDNA表达文库。对文库进行滴度测定和重组子测定。扩增文库并进行PCR鉴定插入序列的长度及分布。结果:文库初始滴度为5×107pfu/mL,扩增后滴度达到1.88×1010pfu/mL。插入片段平均长度1440bp,主要分布在750～2000bp之间。结论:构建的鸡B淋巴细胞cDNAT7噬菌体表达文库具有很高的质量,为进一步研究鸡B细胞发育以及传染性法氏囊病毒(IBDV)的分子致病机制奠定了实验基础。

关 键 词：鸡B细胞 17噬菌体 CDNA表达文库 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]