人幽门螺杆菌热休克蛋白A编码基因的克隆及表达  

作　　者：郭金英[1] 陈彦[2] 刘靳波[1] 姜习新[1] 陈曼[1] 涂植光[1] 

机构地区：[1]重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室,重庆400016 [2]西南大学医院,重庆400715

出　　处：《右江医学》2007年第6期666-668,共3页Chinese Youjiang Medical Journal

摘　　要：目的扩增人幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A(HspA)编码基因并构建其重组表达载体,进行核苷酸序列分析,并在E.coli BL21中表达,为疫苗的开发奠定了基础。方法利用PCR技术从Hp基因组DNA中扩增热休克蛋白A(HspA)基因片段,目的基因经SacⅠ和XhoⅠ双酶切、纯化后,插入pET32a(+)载体。以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL21并表达。结果经PCR、酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hp HspA编码基因,与GenBank报道的相比较,核酸同源性达98%。经SDS-PAGE分析,表达的融合蛋白分子量约为33 KD,其中目的蛋白的分子量约为13 KD。结论成功地克隆并表达了Hp HspA编码基因,为HspA蛋白质疫苗的研制和快速诊断试剂盒的开发奠定了良好的基础。

关 键 词：幽门螺杆菌 热休克蛋白A 重组载体 基因表达 

分 类 号：R378[医药卫生—病原生物学] R392[医药卫生—基础医学]