壳聚糖基因纳米粒子的细胞摄入和体外毒性研究  

Investigation on Cellular Uptake and Cytotoxicity of Plasmid DNA-Chitosan Nanoparticles

作　　者：张海玲[1] 王芹[2] 宋丽萍[1] 岳井银[2] 冷希岗[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所天津生物医学材料重点实验室,天津300192 [2]中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所,天津300192

出　　处：《生物医学工程学杂志》2007年第6期1295-1300,共6页Journal of Biomedical Engineering

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30070221);国家科技部专项资助(2005DIB1J094);天津自然科学基金资助项目(05YFJMJC10200)

摘　　要：用分子量为50kDa和400kDa的壳聚糖分别和[α-32P]dATP标记的质粒DNA,在不同的N/P比下,通过复凝聚方法形成基因纳米粒子。对形成的壳聚糖基因纳米粒子(Chitosan gene nanoparticle,CGN)进行表征,评价CGN体外细胞毒性,研究两种壳聚糖形成的基因纳米粒子被A10和K562细胞摄入的量和速度。结果表明:(1)随着壳聚糖分子量和N/P比的增大,形成的基因纳米粒子更易于进入细胞,同时显示纳米粒子的zeta电位与细胞摄入量之间存在关联性;(2)壳聚糖基因纳米粒子的毒性远远小于商品化的细胞转染试剂Lipofectamine2000。Two kinds of chitosan of different molecular weight （ 50kDa and 400kDa） were employed to form nanoparticles with 32P-labeled plasmid DNA at different N/P ratios by complex coacervation method. The characteristics of chitosan gene nanoparticles （CGN） were measured. The cellular uptake of DNA nanoparticles was evaluated by A10 and K562 cells. The in vitro cytotoxicity of DNA nanoparticles was determined by the MTT assays. Cellular uptake of the DNA nanoparticles increased with increasing chitosan molecular weight and NIP ratio. It also correlated with the zeta potential of the DNA nanoparticles. Chitosan-DNA nanoparticles were much less cytotoxic when compared with Lipofectamine 2000-DNA nanoparticles.

关 键 词：质粒 壳聚糖 基因纳米粒子 细胞摄入 细胞毒性 

分 类 号：R318.08[医药卫生—生物医学工程]