细胞因子对HLA-B27启动子的调节作用及其在强直性脊柱炎发病机制中的意义  

Effect of cytokines on transcriptional regulation of HLA-B27 promoter in HeLa cells

作　　者：赵丽珂[1] 古洁若[1] 余得恩[1] 

机构地区：[1]中山大学附属第三医院风湿科,广东广州510630

出　　处：《中国病理生理杂志》2007年第12期2455-2459,共5页Chinese Journal of Pathophysiology

基　　金：国家自然科学基金面上资助项目(No30571735);国家自然科学基金国家杰出青年科学基金资助项目(No30325019);教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(No20060558046);广东省科技资助项目(No2005A30801005)

摘　　要：目的:构建含HLA-B27启动子的HeLa稳定转染细胞株,观察7种细胞因子对HLA-B27启动子及其上游NF-κB及ISRE顺式作用元件活性的调节作用,探讨强直性脊柱炎(AS)等B27相关疾病的发生机制。方法:转染HeLa细胞,抗生素筛选单克隆构建含HLA-B27启动子的稳定转染细胞株。构建HeLa-B27稳定细胞株和HeLa-NF-κB稳定细胞株,在瞬时转染pISRE-luc的HeLa细胞中加入白细胞介素1α(IL-1α)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素α(IFN-α)、干扰素β(IFN-β)、干扰素γ(IFN-γ)和转化生长因子β(TGF-β),观察7种细胞因子对B27启动子及其上游NF-κB和ISRE作用元件的调节作用。另外在HeLa-B27稳定细胞株培养液中同时加入3种细胞因子单克隆抗体和相应细胞因子,观察其对启动子活性的调节作用。结果:TNF-α、IFN-α、IFN-β和IFN-γ均能明显增强HeLa细胞B27启动子活性。细胞培养96h后,IFN-β为最强的启动子诱导剂(5.4倍,P<0.05);细胞培养8h内,TNF-α、IL1-α和IL1-β,可诱导NF-κB的活性增加30倍左右(P<0.05),IFN-α和IFN-β可诱导ISRE的活性增加12倍左右(P<0.05),抗TNF-α抗体对于I类IFN增加的B27启动子活性没有明显的抑制作用。结论:TNF-α和IFN可通过结合于B27启动子中各种转录因子结合元件调控HLA-B27启动子的转录活性,IFN-β可能在强直性脊柱炎等B27相关的脊柱关节病的发病机制中起着重要作用。AIM： To assess the effect of seven cytokines on transcriptional regulation of HLA - B27 promoter, NF - κB and ISRE cis - element activity in HeLa cells. METHODS ： HeLa - HLAB27 promoter stable cell line was constructed. The HeLa - B27 promoter stable cell line, HeLa - NF - κB stable cell line and HeLa cells transfected with plSRE -luc were cultured with different cytokines （IL - 1α, IL - 1β, TNF -α, IFN -α, IFN - β, IFN -γ, and TGF - β）. RESULTS： TNF- α, IFN -α, IFN - β and IFN -γ, increased the B27 promoter activity at 96 h. The strongest inducer was IFN - β, the luciferase activity increased by 5.4 times. TNF - α, IL - 1α and IL - 1β also induced the NF - κB activity at 8 h （ increased around 30 times）. IFN - α and IFN - β increased the interferon - stimulated response element （ISRE） activity 10 times at 6 h. CONCLUSION： TNF-α and interferons increase the B27 promoter activity. IFN- β might play an important role in the pathogenesis of B27 related diseases.

关 键 词：HLA-B27 启动子 细胞因子类 脊柱炎 强直性 

分 类 号：R593.23[医药卫生—内科学]