利用稳定转染细胞模型研究RIG-G基因的生物学功能  

Utilization of the stable ectopic expression cell line as a model for the investigation of RIG-G gene function

作　　者：肖澍[1,3] 贾培敏[1] 宋满根[1] 李冬[2] 潘晓蓉[1] 陈竺[1] 童建华[1] 

机构地区：[1]上海交通大学医学院附属瑞金医院,上海血液学研究所,上海200025 [2]同济大学附属同济医院检验科 [3]中国科学院上海生命科学院、上海交通大学医学院健康科学研究所

出　　处：《中华血液学杂志》2007年第12期795-798,共4页Chinese Journal of Hematology

基　　金：国家自然科学基金(30570778;30670882);973计划(2002CB512805);863计划项目(2006AA02Z19A);上海市教委曙光计划(2003年度)

摘　　要：目的通过建立稳定表达 RIG-G 蛋白的细胞模型研究 RIG-G 基因的生物学功能。方法利用 Tet-off 表达系统在 U937细胞中转入外源的 RIG-G 基因并诱导其表达;比较 RIG-G 基因表达前后细胞生长、形态、细胞周期的分布和表面分化抗原以及相关细胞周期调控蛋白水平的变化。结果RIG-G 蛋白可通过上调细胞周期抑制因子 P21和 P27的蛋白水平,将细胞阻滞在 G_0/G_1期。与转染空质粒对照细胞相比,G_0/G_1期细胞的比例由(43.9±5.6)%增加到(63.9±2.3)%(P<0.01),细胞的生长被抑制,抑制率达到(68.7±0.2)%。此外,RIG-G 蛋白还能使细胞表面分化抗原 CD11C 的表达升高至(61.3±1.1)%,细胞出现胞体变小、核浆比缩小、核凹陷、染色质变粗糙等部分分化的形态特征。而对照细胞的 CD11C 表达则为(18.0±0.4)%(P<0.01)。结论 RIG-G 蛋白具有重要的抑制细胞增殖和促进细胞分化的能力。Objective To investigate the biological function of RIG-G gene by establishing a cell line stably expressing RIG-G protein. Methods Ectopic RIG-G gene was transfected into U937 cells by using Tet-off expression system. Changes before and after RIG-G expression were detected for cell growth, cell morphology, cell surface antigen and cell cycle regulating proteins. Results RIG-G protein arrested the cells at G0/G1 phase and inhibited cell growth by increasing the cell cycle inhibitors P21 and P27. As compared to that in control group, the proportion of cells at G0/G1 phase in RIG-G-expressing cell group increased from （43.9 ±5.6）% to （63.9 ±2.3）% （P〈0.01）. The rate of growth inhibition was （68.7 ±0.2）%. In addition, an increase in CD11C expression [ （61.3 ± 1.1 ）% vs （ 18.0 ± 0.4 ）% （P 〈 0. 01 ） ] and in cells with morphologic features of partial differentiation （ smaller cell size, reduced nucleus-cytoplasm ratio, notched nucleus and coarse chromatin） was also observed in RIG-G-expressing ceils. Conclusions RIG-G has potential abilities to inhibit cell proliferation and promote cell differentiation.

关 键 词：基因 RIG—G Tet-off表达系统 细胞增殖 细胞分化 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]