鼠肝质膜蛋白质组研究的方法评估  

作　　者：陈平[1] 张丽军[1] 李选文[1] 王细娥[1] 曹锐[1] 刘珍[1] 熊继先[1] 彭霞[1] 魏颖娟[1] 银兴峰 王贤纯[1] 梁宋平[1] 

机构地区：[1]湖南师范大学生命科学学院,长沙410081

出　　处：《中国科学（C辑）》2007年第6期601-608,共8页Science in China(Series C)

基　　金：中国人类肝脏蛋白质组计划(CNHLPP;批准号:2004BA711A18);湖南省教育厅及湖南省科技厅研究课题(批准号:05FJ2002;05FJ4018)资助

摘　　要：细胞质膜是细胞中重要的细胞器,在肝功能的发挥中具有非常重要的作用.使用蔗糖密度梯度离心纯化细胞质膜,通过电子显微镜观察和免疫印迹法检验膜的纯度.结果显示,与组织匀浆成分相比,质膜富集了20倍,线粒体的污染减少了约50%.提取的蛋白质用二/一维凝胶电泳(2DE/1DE)分离、胰酶酶解、电喷雾四极杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF)和基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF)鉴定,或者提取的蛋白质直接进行溶液内酶解、液相色谱串联电喷雾离子阱质谱(LC-LTQ)(鸟枪法)鉴定.一共鉴定了547个非冗余蛋白质,其中34%为质膜或质膜相关蛋白质.优化和评估了质膜蛋白质组研究的方法,且对鼠肝质膜蛋白质组进行了系统的分析.

关 键 词：肝 细胞质膜 蛋白质组 质谱 2DE 鸟枪法 1DE 

分 类 号：Q51[生物学—生物化学]