CpG寡脱氧核苷酸促进小鼠清除体内结核分枝杆菌的机制  

A study on the mechanisms of mycobacterial clearance induced by CpG-oligodeoxynucleotides in mice

作　　者：任涛[1] 梁永杰[1] 蔡映云[2] 李传友[3] 梅建 袁正宏[4] 陶梦非[1] 田苗[3] 赵冰[3] 

机构地区：[1]同济大学附属东方医院呼吸科,上海200120 [2]复旦大学呼吸疾病研究所 [3]北京市结核病胸部肿瘤研究所 [4]复旦大学医学分子病毒学教育部重点实验室 [5]上海市疾病预防与控制中心

出　　处：《中华结核和呼吸杂志》2008年第1期46-50,共5页Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases

摘　　要：目的探讨CpG寡脱氧核苷酸（CpG-ODN）增强小鼠体内结核分枝杆菌清除能力的可能机制。方法将雌性BALB/c小鼠随机分为免疫组36只和对照组24只，并分别腹腔注射CpG-ODN30μg（溶于200Ixl生理盐水）和200山生理盐水。2周后每只小鼠经尾静脉注射结核分枝杆菌H37Rv1×10^6CFU。感染后3周和4周每组分别处死12只小鼠，免疫组小鼠饲养至感染后6周处死。肺和脾组织进行菌落计数，观察肺和脾组织的病理学变化。用实时定量聚合酶链反应方法检测肺和脾组织γ-干扰素、白细胞介素（IL）-4、IL-10、IL-12、IL-18和诱导型-氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达的相对含量。组间比较采用t检验。结果感染后3周，免疫组小鼠的肺和脾组织经培养后无结核分枝杆菌生长。感染后4周，免疫组小鼠的肺和脾组织培养后有结核分枝杆菌生长，但明显少于对照组；肺组织中IL-18、γ-干扰素和iNOS的mRNA表达的相对含量分别为（3.6±0.5、0.32±0.14和23.2±4.7），均明显高于对照组的（1.6±1.1、0.20±0.10和16.24±5.1），IL-12p40mRNA表达的相对含量（5.7±0.6）明显低于对照组（14.5±1.9），IL-4和IL-10mRNA表达的相对含量（0.30±0.09和0.28±0.05）与对照组（0.26±0.05和0.29±0.08）无明显差别；脾组织中IL.18、γ-干扰素和iNOSmRNA表达的相对含量（5.5±1.3、0.52±0.07和9.14-1.8）明显高于对照组（0.8±0.4、0.21±0.06和6.0±1.4），IL-12p40、IL4和IL-10mRNA表达的相对含量（2.1±0.3、0.23±0.10和0.10±0.04）明显低于对照组（5.14±0.4、1.21±0.26和0.57±0.13）。与感染后4周比较，免疫组小鼠感染后6周，肺组织γ-干扰素mRNA表达的相对含量（0.95±0.27）明显增高，IL-18、IL-4和IL-10mRNA表达的相对含量（3.514±0.86、0.45±0.35和0.24±0.21）无明显变化，IL-12p40和iNOSmRNA表达的相对含量（1.72±1.41和1.1±0.5）明显降低；脾组织IL-12p40和IL-18mRNA表达的相对含量（0.08±0.Objective To investigate the possible mechanisms of mycobacterial clearance induced by CpG-oligodeoxynucleotides （CpG-ODN）in mice. Methods Eight-week-old female BALB/c mice were treated with intraperitoneal CpG-ODN （30 μg）, while the control mice with normal saline. After 2 weeks, the control mice and the CpG-treated mice were infected with Mycobacterium tuberculosis （ 1 × 10^6 colonyforming units, H37 Rv strain） through the tail vein. At 3 weeks,4 weeks and 6 weeks after mycobacterial infection, the lung and the spleen tissues were examined for histopathological changes. Real time-PCR was performed to measure the messenger RNA （mRNA） of interleukin （IL）-12, IL-18, interferon （IFN）-γ, IL- 4,IL-10 and inducible nitric oxide synthase （iNOS） in the tissues. The homogenates of lungs and spleens were cultured, and the colonies were counted after a 4 weeks incubation period at 37℃. Results At 3 weeks and 4 weeks of mycobacterial infection, CpG-ODN-pretreated mice showed less mycobacterial burden in the lungs and the spleens than that in the control mice [ （0 ±0） vs 106 CFU/g vs （32 ± 11 ） × 10^6 CFU/g, （0 ±0） × 106 CFU/g vs （10 ±） × 10^6 CFU/g; （26 ±） × 10^6 CFU/g vs （56 ±） × 106 CFU/g, （4 ±） × 10^6 CFU/g vs （27 ±8） × 10^6 CFU/g]. At 4 weeks of mycobacterial infection, CpG-ODN-pretreated mice displayed increased levels of IL-18 mRNA, IFN-18 mRNA, iNOS mRNA [ （3.6 ±. 5, 1.6 ±1.1, 0. 32 ±0. 14） vs （0. 20 ± 10, 23.17 ±. 72, 16. 18 ±.09） ], and decreased level of IL-12p40 mRNA （5. 66 ±0. 64 vs 14.54 ±1.89） , but there was no difference in the levels of IL-4 mRNA and IL-10 mRNA in the lungs between CpG-ODN-pretreated mice and the control mice [ （ 0. 30 ± 0. 09 vs 0. 26 ±0. 05 ）, （ 0. 28 ±0. 05 vs 0. 29 ±0. 08 ） ]. CpG-ODN-pretreated mice displayed increased levels of IL-18 mRNA, IFN-18 mRNA, iNOS mRNA [ （5. 54 ±1.29 vs 0. 79 ±. 36）, （0. 52 ±0. 07 vs 0. 21 ±0.06）, （9. 07 ±1.81 vs 5.97 ±1.44） ], an

关 键 词：分枝杆菌 结核 寡脱氧核糖核苷酸类 TOLL样受体9 

分 类 号：R686[医药卫生—骨科学]