血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体的制备及鉴定  

作　　者：石琦[1] 单冰[1] 高晨[1] 姜慧英[1] 张宝云[1] 韩俊[1] 董小平[1] 

机构地区：[1]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所朊病毒病室传染病预防控制国家重点实验室,北京100052

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第2期142-143,146,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金委重点资助项目(30130070);国家自然科学基金资助项目(30571672);国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2002AA215021)

摘　　要：目的:制备血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体(mAb),并对其特性进行鉴定。方法:以重组His-Trx-VEGF1-165蛋白为抗原,通过免疫、融合、克隆和筛选等方法制备VEGF mAb,制备小鼠腹水并测定其效价、染色体数目及免疫球蛋白亚类,用Western blot方法分析其特异性。结果:成功筛选出能稳定分泌的VEGF mAb杂交瘤细胞株4E4-H5,制备腹水的ELISA效价为1∶106;染色体数目为105条;抗体分型为IgG1亚型,κ轻链;Western blot证实所获得的mAb可与VEGF全长蛋白发生特异性反应,但是与融合蛋白的标签蛋白His-Trx不发生反应。结论:制备的杂交瘤细胞株能稳定分泌高滴度和高特异性的VEGF mAb,为建立能够用于肝癌诊断的血清VEGF检测技术提供了参考。

关 键 词：血管内皮生长因子 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 

分 类 号：R392-33[医药卫生—免疫学]