抗HBsAg人源抗体Fab片段原核表达的优化  

作　　者：焦永军[1] 曾晓燕[1] 史智扬[1] 汪华[1] 崔仑标[1] 龚希萍[2] 薛蓉[2] 周镇先[2] 

机构地区：[1]江苏省疾病预防控制中心卫生部肠道病原微生物重点实验室,江苏南京210009 [2]南京市第二医院,江苏南京210003

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第2期147-149,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：南京市科委社会发展资助项目(200502016)

摘　　要：目的:优化抗HBsAg人源抗体片段hFabHB1在大肠杆菌中功能性表达的条件。方法:通过测定宿主菌培养物A600值观察10g/L的葡萄糖对宿主菌生长的影响;比较诱导前是否更换培养液的2种不同条件hFabHB1的表达产量;比较在37℃和25℃2种诱导温度下功能性hFabHB1分子的表达量以及Fd和轻链表达的平衡性。大量表达的功能性hFab-HB1分子经亲和层析纯化后,用ELISA鉴定其生物活性。结果:在培养液中加入10g/L的葡萄糖可有效抑制重组蛋白的本底表达,增加宿主菌的生长速度;在加入IPTG诱导前更换培养液可明显提高hFabHB1的表达产量;25℃的诱导温度比37℃能表达更多的功能性Fab分子,并且Fd和轻链表达量也更趋于平衡。经亲和层析纯化的hFabHB1分子可与HBsAg特异性结合。结论:实验结果为在原核系统中大量表达该抗体片段提供了技术储备。

关 键 词：抗HBsAg人源抗体 hFabHB1 原核表达 优化 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]