N末端缺失萝卜谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶的表达、纯化及结构预测  

Expression,Purification of a Recombinant N-Terminal 32 Amino Acids Deletion Radish PHGPx

作　　者：王丰[1] 刘进元[1] 

机构地区：[1]清华大学生物科学与技术系,北京100084

出　　处：《吉林大学学报（理学版）》2008年第1期148-153,共6页Journal of Jilin University:Science Edition

基　　金：国家自然科学基金(批准号:3017008039770078);国家重点基础研究发展计划项目基金(批准号:2006CB101703);国家863计划项目基金(批准号:2007AA100604);清华-裕元医学科学研究基金

摘　　要：将N末端定位信号缺失萝卜PHGPx(RsPHGPx)的cDNA片段克隆到表达载体pGEX-6P-1上,并转化至大肠杆菌内进行表达.通过GST亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析,制备了用于晶体学研究的RsPHGPx.其浓度约为10 g/L,纯度超过95%,具有PHGPx活性.三维结构同源建模显示RsPHGPx的结构为典型的硫氧还蛋白折叠形式.An N-terminal 32 amino acids radish PHGPx gene （△32RsPHGPx） was cloned into expression vector pGEX-6P-1 and transformed into E.coli strain BL2.1 （DE3）. A32RsPHGPx for crystallization was prepared via Glutathione SepharoseTM affinity, cation-exchange and gel filtration chromatographies. The concentration of it was 10 g/L and the purity was over 95%. △32RsPHGPx showed obvious PHGPx activity towards lipid hydroperoxides. In addition, a tertiary structure model of △32RsPHGPx displayed the thioredoxin fold.

关 键 词：萝卜 谷胱甘肽磷脂氢过氧化物酶 表达 纯化 

分 类 号：Q518.2[生物学—生物化学]