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作 者:周伟[1] 吴兴安[1] 罗雯[2] 胡刚[1] 张芳琳[1] 白文涛[1] 张亮[1] 于澜[1] 史梦远[1] 徐志凯[1]
机构地区:[1]第四军医大学微生物学教研室,陕西西安710032 [2]西安文理学院生命科学系,陕西西安710065
出 处:《细胞与分子免疫学杂志》2008年第1期49-51,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基 金:国家自然科学基金资助项目(30471626);全军医药卫生科研基金资助项目(06MA219);陕西省自然科学基金资助项目(2004C2-42)
摘 要:目的:建立能表达抗汉滩病毒中和性鼠/人嵌合抗体基因的转基因植株,为汉坦病毒基因工程抗体的研究提供实验基础。方法:将构建的含抗汉滩病毒中和性鼠/人嵌合抗体基因的植物抗体表达质粒3G1MH-pCAMB IA2301,用TSS冻融法导入农杆菌GV3101,利用农杆菌介导的抽真空转基因技术转化野生型拟南芥,获得转基因植株。用PCR、Northernblot检测转基因植株。结果:经PCR分析表明,拟南芥的基因组中有抗汉滩病毒中和性鼠/人嵌合抗体基因整合,并成功获得7株T0代转基因拟南芥。植株提取RNA,经Northernblot分析可见约1 500 bp及800 bp处的目的条带,为编码重、轻链的目的基因。结论:成功地构建了含抗汉滩病毒中和性鼠/人嵌合抗体基因的拟南芥植株,为进一步利用植物表达治疗性抗体奠定了基础。AIM: To construct the transgenic Arabidop- sis thaliana containing full-length gene of mouse/human chimeric antibody ( 3G1MH ) against Hantaan virus. METHODS: The recombinant plasmid 3G1 MH-pCAMBIA2301 was transformed into Agrobacterium tumefaciens GV3101 by TSS freeze-thaw method, and then the recombinant was transferred into wild Arabidopsis thaliana by vacuum-transgenic method. The regenerated transgenic plants were selected with kanamycin, and confirmed by PCR and Northern blot. RESULTS: PCR result showed stable integration of the 3G1MH gene IN Arabidopsis thaliana genome in 7 stains of the transformed plants. Northern blot analyses confirmed the transcription of heavy and light chains in the transgenic plants. CONCLUSION: The successful establishment of 3G1 MH transgenic Arabidopsis thaliana plants pave the way for further research on expressing therapeutic antibody in transgenic plants.
分 类 号:Q78[生物学—分子生物学] R373[医药卫生—病原生物学]
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