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作 者:方玲[1] 胡迎春[2] 杨柳[3] 刘梦伊[1] 刘昕[1] 潘兴斌[1] 吴德昌[2] 霍艳英[2]
机构地区:[1]兰州大学基础医学院病理生理教研室,兰州730000 [2]军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850 [3]重庆医科大学病理学教研室,重庆400016
出 处:《军事医学科学院院刊》2008年第1期23-26,共4页Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences
基 金:国家自然科学基金项目(No.30471946);北京市自然科学基金项目(No.7052056)
摘 要:目的:在多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)在多效生长因子对Schlafen2(Slfn2)基因负性调控中发挥的作用。方法:本研究用Ptn-siRNA B/MEF241细胞的培养液培养对照NC细胞不同时间,通过Northern杂交检测NC细胞中Slfn2表达水平变化;应用RT-PCR和Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50 ng/μl)作用对Ptn沉默细胞内IL-1表达水平的影响;分别使用重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)和IL-1α中和抗体阻断IL-1的作用通路,检测Ptn稳定沉默细胞中Slfn2基因表达变化。结果:Ptn沉默细胞培养液可以诱导对照细胞Slfn2表达;外源性PTN能抑制沉默细胞中IL-1α和IL-1f6的表达;IL-1受体拮抗剂(rhIL-1ra)和IL-1α中和抗体可抑制Ptn沉默细胞中Slfn2表达。结论:Ptn可能部分通过分泌性的细胞因子间接调控Slfn2基因表达,并且鉴定出在此调控过程中IL-1家族是其中一种非常重要的调控因子。Objective: To analyze the effect of intedeukin-1 involved in expression regulation of Schlafer/2(Slfn2) in the pleiotrophin (Ptn) knock down mouse embryo fibroblast cell lines. Methods: In the previous study, we found the mRNA expression of Slfn2 gene and interleukin-1 ( IL-1 ) was increased in Ptn-siRNA B/MEF241 cells when compared to control cells. In this study, mRNA expression of Slfn2 gene was detected in the control cells that incubated with the supematant of Ptn-siRNA B/MEF241 cells. Then the expression change of IL-1α and IL-1f6 was detected in the Ptn-siRNA B/MEF241 cells treated by 50 ng/vd recombinant human PTN( rh PTN), We investigated the induction of Slfn2 gene expression in the presence of rhIL-1ra and IL-1α affinity purified polyclonal antibody. Results: (1)The expression of Slfn2 in the control cells can be induced by incubation with the culture medium of Ptn-siRNA B/MEF241 cells. (2)Using rh PTN can inhibit the expression of IL-1α and IL-1f6 in Ptn-siRNA B/MEF241 cells. (3) The expression of Slfn2 in the Ptn-siRNA B/MEF241 cells can be inhibited in the presence of rhIL-1ra and IL-1α affinity purified polyclonal antibody. Conclusion: IL-1 may play an important role in pleiotrophin negative regulation of Slfn2 in Ptn-siRNA B/MEF241 cells.
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