蛋白激酶C与钙离子在凝血酶受体活化过程中的作用  

Effect of protein kinase C and calcium on the thrombin receptors activation

作　　者：韩悦[1] 王兆钺[1] 谢颖[1] 张威[1] 戴兰[1] 沈文红[1] 吴德沛[1] 阮长耿[1] 

机构地区：[1]苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室,215006

出　　处：《中华血液学杂志》2008年第3期154-157,共4页Chinese Journal of Hematology

基　　金：教育部回国人员基金（K5122422）;苏州市国际科技合作项目（SW200412）

摘　　要：目的比较两类凝血酶受体活化过程中蛋白激酶C（PKC）与钙离子（Ca^2＋）对血小板聚集率以及血小板膜表面活化标志物糖蛋白（GP）Ⅰb表达的影响，探讨G蛋白q（Gq）信号途径在凝血酶受体活化过程中的作用。方法分别以凝血酶受体活化肽PAR1-AP（SFLLRN）与PAR4-AP（AYPGKF）模拟各自的固定配基活化血小板。观测PKC选择性抑制剂Ro-31-2220与胞内Ca^2＋螯合剂（BAPTA／AM）作用过程中血小板聚集与血小板膜表面GPⅠb的改变。结果两类凝血酶受体活化肽均能诱导血小板活化，产生完全的聚集波，血小板膜GPⅠb则呈现进行性减少后逐渐回升的可逆性变化。BAPTA与Ro-31-2220预处理后蛋白激酶活化受体（PAR）肽诱导的血小板聚集被抑制，但形态变化依然存在。Ro-31-2220明显抑制PAR1-AP引起的GPⅠbα内陷[1min时为（87．0±0．04）％，2min时为（73．00±0．08）％，P〈0．05]；PAR4-AP可以延长GPⅠbα在胞内的逗留，减缓其返回血小板表面的进程[10min时为（44．00±0．01）％，30min时为（46．00±0．05）％，P〈0．05]。BAPTA则能明显抑制两类PAR肽引起的GPⅠbα内陷[1min时分别为（94．00±0．08）％和（95．00±0）％，2min时分别为（92．00±0．02）％和（94．00±0．01）％，5min时分别为（91．00±0．02）％和（91．00±0．02）％，10min时分别为（90．00±0．04）％和（87．00±0．03）％，各时间点之间比较P值均〈0．05]。结论PKC与Ca^2＋在凝血酶受体活化中发挥重要作用。Ca^2＋与凝血酶受体活化过程密切相关，对两类受体作用相似。PKC在PAR1途径促使GPIb内陷，在PAR4途径则加速GPⅠb重返膜表面。Objective To compare the effects of protein kinase C （PKC） and calcium （Ca^2＋ ） on platelet aggregation and platelet membrane surface GP I b expression in thrombin receptors activation, and investigate the role of Gq signal transduction pathway in such activation. Methods Peptide SFLLRN （ PAR1- AP） and AYPGKF （PAR4-AP） were used to stimulate platelet, and the effects of Ro-31-2220 （inhibitor of PKC） and BAPTA/AM （calcium chelator） on the platelet aggregation and GP I b were analyzed. Results Either 25 μmol/L PAR1 or 250 μmol/L PAR4 peptide could induce absolute platelet aggregation with a reversible internalization of GP Ⅰ b. Platelet aggregation was inhibited by Ro-31-2220 or BAPTA while the morphological change curve still occurred upon PARs activation. In addition, Ro-31-2220 decreased GPⅠb centralization upon PAR1 stimulation [ （ 87. 00 ± 0.04） % and （ 73. 00 ± 0.08 ） %, respectively at 1, 2 min, P 〈 0.05 ], albeit it blocked the internalization of GPⅠb in PAR4 activation [ （44. 00 ± 0.01 ） % and （46. 00 ± 0.05 ） %, respectively at 10, 30 min, P 〈 0.05 ]. Meanwhile, GPⅠb internalization was blocked by BAPTA in both peptides [ （94.00±0.08）% and （95.00±0.00）% at 1 min, （92.00 ±0.02）% and （94.00±0.01）% at 2 min, （91.00±0.02）% and （91.00±0.02）% at 5 min, （90.00±0.04）% and （87. 00 ± 0.03） % at 10 min, respectively, P 〈 0.05 ]. Conclusion PKC and calcium play an important role in thrombin receptor activation. Calcium is closely correlated with such activation, being similar in the two PARs signal pathways. PK C promotes GP I b centralization in PAR1 pathway and accelerates GP I b return to membrane surface in PAR4 pathway.

关 键 词：血小板 受体 凝血酶 糖蛋白Ⅰb 蛋白激酶C 钙 

分 类 号：R686[医药卫生—骨科学]