烯脂酰辅酶A水解酶单克隆抗体的制备与鉴定  

作　　者：刘蓉[1] 鞠艳芳[1] 杨金菊[1] 杜雪梅[1] 陈勇[1] 刘莹[1] 高建恩[1] 孙启鸿[1] 

机构地区：[1]蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京102206

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第4期387-388,392,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA02A311);国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2006CB910803)

摘　　要：目的:制备小鼠抗人烯脂酰辅酶A水解酶(enoyl CoA hydratase,ECHS1)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,并通过间接ELISA、Western blot、免疫沉淀、免疫组化和间接免疫荧光等方法对mAb进行特异性鉴定,通过Uni-ZAP XR正常成人肝脏cDNA表达文库筛选鉴定抗原。结果:获得1株可稳定分泌抗人ECHS1 mAb的杂交瘤细胞株BGB095。该mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ),可用于ELISA检测、Western blot、免疫沉淀、免疫组化等实验。结论:成功制备了抗人ECHS1的mAb,为代谢疾病和肿瘤的研究提供了有力的工具。

关 键 词：ECHS1 单克隆抗体 线粒体 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]