His标签单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用  

作　　者：王文礼[1] 王云龙[2] 李晨阳[2] 陈小科[2] 刘利锋[3] 

机构地区：[1]河南师范大学,河南新乡453007 [2]河南省生物工程技术研究中心 [3]北京协和医院,北京100730

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第4期399-400,共2页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家科技支撑计划资助项目(2006BAF07B01)

摘　　要：目的:制备和鉴定抗His标签单克隆抗体(mAb),初步建立检测和纯化带His标签融合蛋白的方法。方法:用碳化二亚胺法合成His-tag完全抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术进行细胞融合,通过有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株。常规制备腹水,用辛酸-硫酸铵法纯化,并对纯化的mAb进行特异性鉴定。结果:His-tag完全抗原偶联成功,经细胞融合、筛选及克隆化,成功获得1株分泌His标签mAb的杂交瘤细胞株。制备腹水测得腹水效价高于1∶106,且此株mAb与其他融合蛋白标签无交叉反应,并在含His标签融合蛋白的鉴定实验中取得了满意效果。结论:成功制备了1株His标签mAb,为带His标签融合蛋白的研究应用提供了重要的工具。

关 键 词：His标签 单克隆抗体 蛋白印迹 

分 类 号：Q81[生物学—生物工程] R392.11[医药卫生—免疫学]