37Glu突变型MBL蛋白在CHO细胞中的表达及其生物学特性研究  

作　　者：李瑞芳[1] 赵娜[1] 刘凤玲[1] 张丽芸[1] 陈政良[1] 

机构地区：[1]南方医科大学免疫学教研室,广东广州510515

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第4期409-412,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：广东省自然科学基金研究团队资助项目(015003)

摘　　要：目的:探索甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因GGA57GAA点突变引起免疫缺损的机制。方法:采用PCR从质粒pMBLm57中扩增含GGA57GAA点突变的MBL基因,构建重组真核表达载体,电转染CHO细胞,以Zeocin筛选并克隆化培养,用mAb-Sepharose 4B和Ni2+-NTA agarose层析纯化目的蛋白,以SDS-PAGE、Western blot、ELISA、配体结合试验、C4d沉积试验等鉴定目的蛋白。结果:重组真核表达载体pcDNA4/HisMax C-MBLm57转染CHO细胞后获得5株稳定表达目的蛋白的单克隆细胞株;37Glu突变型MBL蛋白主要以双链(Mr约60000)存在,不能形成高聚体;其配体结合能力低下,与MASP-2N端蛋白的结合能力也降低,不能通过凝集素途径激活补体系统。结论:GGA57GAA点突变产生结构有缺陷的MBL蛋白,进而影响其识别功能和效应功能。

关 键 词：甘露聚糖结合凝集素 GGA57GAA突变体 37Glu突变型蛋白 识别功能 效应功能 

分 类 号：R392.3[医药卫生—免疫学]