氯化硝基四氮唑蓝显色检测超氧阴离子自由基的研究  

Spectrophotometric Determination of Superoxide Anion Radical with Nitroblue Tetrazolium

作　　者：刘瑞恒[1] 付时雨[1] 詹怀宇[1] 

机构地区：[1]华南理工大学制浆造纸工程国家重点实验室,广东广州510640

出　　处：《分析测试学报》2008年第4期355-359,共5页Journal of Instrumental Analysis

基　　金：国家自然科学基金资助项目(20477046);国家高技术研究发展计划(863计划)重点项目(2007AA100704)

摘　　要：将超氧化钾(KO2)溶解于二甲基亚砜(DMSO)和十八冠醚混合溶剂中可以制备稳定的超氧阴离子自由基(O2-.)的溶液,在该溶液体系中O2-.与氯化硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)可以定量反应生成蓝色的单甲臢(monoformazan),用分光光度法进行检测。研究证实:单甲臢在DMSO溶液中的最大吸收波长为680 nm;反应时间和反应温度对测定结果有一定的影响。NBT与O2-.反应5 min较为适宜;由于低温条件下O2-.较为稳定,故测定温度维持在20℃左右。反应后体系吸光度与O2-.量之间的线性方程为:A680=(-0.071±0.015)+(2.607±0.037)X,r=0.999 8,其中X为O2-.的量,标准偏差为1.4%。抗坏血酸对O2-.清除效果的验证实验表明,该方法可应用于实验室抗氧化剂的筛选与研究。Highly stable superoxide anion radical （O-2·） solution prepared by dissolving KO2 in dimethyl sulfoxide （DMSO） and 18-crown-6 ether could react with nitroblue tetrazolium to form a blue compound with a maximum absorbance wavelength at 680 nm. Spectrophotometric results showed that the optimum time and temperature for the reaction of O-2· and NBT was 5 rain and 20 ℃, respectively, and that the relationship between monoformazan absorbance and O-2· concentration was linear with a correlation coefficient of 0. 999 8. The standard deviation was 1.4%. It was found that ascorbic acid could eliminate O-2· effectively, thus the proposed method can also be used for the screening of antioxidants in the laboratory.

关 键 词：超氧阴离子自由基(O-2.) 氯化硝基四氮唑蓝(NBT) 超氧化钾(KO2) 二甲基亚砜(DMSO) 比色法 

分 类 号：O657.32[理学—分析化学]