猪附红细胞体特异性基因的克隆和PCR诊断方法的建立  被引量:16

Establishment of the PCR assay for detection of Mycoplasma suis

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作  者:冯会权[1] 苏玉虹[1] 苏荣健[1] 朱宝芹[1] 赵晓薇[1] 聂茹[1] 赵微[1] 巴彩凤[1] 

机构地区:[1]辽宁医学院实验动物中心,辽宁锦州121001

出  处:《中国预防兽医学报》2008年第5期371-374,共4页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基  金:辽宁省科技基金资助项目(2006408002-4)

摘  要:根据2003年Hoelzle发表的猪附红细胞体的基因组序列(AJ504999)设计一对特异性引物,对病料样品进行PCR扩增并将其产物克隆到pMD18-T载体后测序,结果表明扩增出的片段为603bp,同源性分析表明该序列与参考基因组序列同源性为100%,反映出我国分离株与国外株其基因无差异,特异性和敏感性试验表明,所建立的PCR诊断方法与常见的支原体、细菌及原虫无交叉反应,能检测到猪附红细胞体血液基因组DNA最低量为0.65ng/mL,该方法具有快速、特异、敏感等特点,为猪附红细胞体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段。To establish a PCR-based assay for the detection of Mycoplasma suis (M.suis), a pair of primers were designed according to the sequence published by Hoelzle in 2003 (AJ504999). The PCR product contained 603 bp which was identical to the published sequence. The PCR assay was specific and could detect 0.65 ng/mL of M, suis, It is a quick method that could be used for epidemiology study and early clinical diagnose of M.suis.

关 键 词:猪附红细胞体 PCR 克隆 

分 类 号:S852.61[农业科学—基础兽医学]

 

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