土槿皮乙酸诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡及机制  

Molecular mechanisms of pseudolaric acid B induced apoptosis in SGC7901 cells

作　　者：徐永红[1] 王学清[1] 鞠晓华[1] 赵立杰[1] 李岩[1] 

机构地区：[1]中国医科大学盛京医院消化内科

出　　处：《中国药理学通报》2008年第5期601-606,共6页Chinese Pharmacological Bulletin

摘　　要：目的研究土槿皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)诱导人胃癌SGC7901细胞株凋亡及其分子机制。方法MTT法检测细胞增殖的抑制作用,电镜观察细胞的形态学变化,An-nexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率,罗丹明染色流式细胞仪检测线粒体膜电位,Western blot检测PAB对caspase-3、caspase-9剪切片断,bcl-2、bax蛋白表达,及对MAPKs通路相关蛋白,包括p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38、p38表达的影响。结果PAB对人胃癌SGC7901细胞株生长具有明显的抑制作用,并呈时间和浓度依赖性。电镜结果显示0.5μmol·L-1PAB作用24 h后,核染色体聚集、边集,72 h凋亡小体形成。用0.5μmol·L-1PAB处理SGC7901细胞12、24、48、72 h,AnnexinV/PI双染检测细胞的早期凋亡,其早期凋亡率分别为10.06%、15.98%,23.12%,29.06%,而对照组的早期凋亡率仅为0.9%(P<0.05)。罗丹明染色检测线粒体膜电位,0.5μmol·L-1浓度的PAB作用于SGC7901细胞12 h后,线粒体膜电位开始下降并随时间延长而逐渐增加,12、24、48、72h线粒体膜电位下降分别为26.36%、33.26%、41.28%、52.13%(P<0.05或0.01)。0.5μmol·L-1浓度的PAB作用于SGC7901细胞24h后,Western blot法检测发现caspase-3、caspase-9 2种蛋白均出现断裂片断,并随着时间的增加断裂更明显。进一步研究发现,PAB处理SGC7901细胞后,bax蛋白表达升高,bcl-2蛋白表达下降,同时JNK、p38的磷酸化水平明显升高,ERK表达水平下降。结论PAB具有明显的细胞毒作用,能诱导SGC7901细胞凋亡,JNK和p38途径激活后通过对bax和bcl-2表达的调控,导致线粒体膜电位的下降,进而激活caspase最终导致细胞死亡,可能是其诱导胃癌细胞凋亡的分子机制之一。Aim pseudolaric acid To study molecular mechanisms of B （ PAB ） induced apoptosis in SGC7901 cells. Methods Cytotoxicity was analyzed by MTT. Electron microscopy was used to observe mor- phological changes. Early apoptotic ceils stained with AnnexinV/PI and the loss of mitochondrial membrane potential（△ψm） stained with Rhodamine123 were examined using flow cytometry. The protein expression of ERK,JNK, p38 , bax , bcl-2, caspase-3 and -9 were detected by Western blot analysis. Results PAB could induce apoptosis in human SGC7901 ceils, as characterized by morphological changes, the loss of △ψm, activation of caspase-3 and -9. Molecular data showed that PAB decreased bcl-2 protein and increased bax protein. Moreover, PAB could activate c-Jun NH2-terminal kinase （JNK） and p38 kinase. Conehl- sions These findings indicated that JNK- and p38 ki- nase mediated mitochondrial pathways might be in- volved in PAB-induced apoptosis and enhanced the un- derstanding of the anticancer function of PAB in herbal medicine.

关 键 词：土槿皮乙酸 SGC7901细胞 细胞凋亡 信号转导 

分 类 号：R284.1[医药卫生—中药学] R329.24[医药卫生—中医学]