TNF-α转化酶酵母双杂交系统“诱饵”质粒的构建及鉴定  

Construction and identification of bait recombinant vector of tumor necrosis factor-a converting enzyme in the yeast twohybrid system

作　　者：刘鑫[1] 于洪伟[1] 王凤丹[1] 王建醒[1] 王淑娟[1] 于晓光[1] 

机构地区：[1]哈尔滨医科大学基础医学学院生物化学与分子生物学教研室,黑龙江哈尔滨150081

出　　处：《中国应用生理学杂志》2008年第2期144-146,232,共4页Chinese Journal of Applied Physiology

基　　金：黑龙江省卫生厅科研基金资助项目(2006-260)

摘　　要：目的:构建酵母双杂交系统"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4 Two-Hybrid System 3中的自激活和毒性作用。结果:本实验成功构建了"诱饵"质粒载体pGBKT7-TACE,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。结论:构建的诱饵质粒pGBKT7-TACE可应用在酵母双杂交系统中,为筛选小鼠cDNA文库中与TACE相互作用的蛋白奠定实验基础。

关 键 词：TNF-α转化酶 酵母双杂交系统 自激活作用 

分 类 号：Q782[生物学—分子生物学]