抗人硫氧还蛋白-1单克隆抗体的制备与鉴定及初步应用  

作　　者：唐文心[1] 王建和[1] 陈正望[1] 陈孝平[1] 

机构地区：[1]华中科技大学生命科学与技术学院生物物理与生物化学研究所,湖北武汉430074

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第6期597-600,共4页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30370647;30470823)

摘　　要：目的:制备抗硫氧还蛋白-1(TRX-1)的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:以原核表达的TRX-1为抗原免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。采用有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株,用ELISA检测mAb腹水的效价、相对亲和力和进行表位分析,用Westernblot法对mAb的特异性进行鉴定。结果:得到筛选出3株能稳定分泌抗TRX-1的杂交瘤细胞株B6、D5和E3,免疫球蛋白亚类均为IgG1(κ),腹水mAb效价均在106以上,3株抗体分别针对不同抗原表位。用mAb建立的竞争抑制ELISA灵敏度达1.22μg/L。结论:获得3株特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗TRX-1的杂交瘤细胞株,为研究TRX-1在人类细胞、血液、组织中的表达及定位提供了可能,并为探索相关炎症、癌症发病机制及新治疗方法提供了强有力的工具。

关 键 词：人硫氧还蛋白-1 单克隆抗体 竞争抑制ELISA 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]