耻垢分枝杆菌glmU基因克隆、表达及多克隆抗体的制备  

作　　者：张文利[1] 申慧[1] 辛毅[2] 马郁芳[1] 

机构地区：[1]大连医科大学生物化学教研室,辽宁大连116044 [2]大连医科大学生物技术系

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》2008年第6期601-603,共3页Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30670454);国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2006CB504400)

摘　　要：目的:制备抗耻垢分枝杆菌(Smeg)GlmU的多克隆抗体,并对其特异性进行鉴定。方法:用PCR技术扩增SmegglmU,构建可在大肠杆菌中表达的重组质粒pET29b-SmegglmU,用IPTG诱导表达,经Ni-NTA-Agarose柱层析纯化后,以其为免疫原制备抗SmegGlmU的多克隆抗体,并以间接ELISA方法测定抗体效价,以Western blot方法鉴定抗体的特异性。结果:在大肠杆菌中得到了可溶性表达的SmegGlmU;以其免疫小鼠获得抗血清,Western blot鉴定显示获得了能特异性地作用于耻垢分枝杆菌GlmU的多克隆抗体,ELISA测定表明其效价高于1∶6400。结论:获得了能特异性地作用于耻垢分枝杆菌GlmU的高效价多克隆抗体,为应用反义RNA技术研究glmU基因的功能奠定了基础。

关 键 词：GlmU 多克隆抗体 分枝杆菌 

分 类 号：R392.11[医药卫生—免疫学]