抗猪瘟病毒NS3(p80)蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定  

Preparation of monoclonal antibodies against NS3(p80) protein of CSFV

作　　者：鲁絮[1] 张彦明[1] 郑增忍[2] 穆杨[1] 龚振华[2] 李葳[2] 徐浩[1] 余欣[1] 

机构地区：[1]西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100 [2]中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266032

出　　处：《中国预防兽医学报》2008年第6期464-468,共5页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金项目(30270988);陕西省自然科学基金项目(2006C121)

摘　　要：在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达猪瘟病毒石门株NS3基因部分功能片段,以纯化的重组NS3(p80)蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA筛选及3次连续克隆化获得了4株可分泌抗NS3单抗的杂交瘤细胞(2G7,2F11,5D2和6F11),通过小鼠体内诱生法制备腹水,并对杂交瘤细胞和单克隆抗体的特性进行鉴定。结果表明,杂交瘤细胞染色体正常,抗体分泌稳定,单抗效价高,亲和力各不相同,Ig亚类鉴定均为IgG1。Westernblot分析证明4株单抗均能与原核表达的NS3蛋白特异性结合,6F11株与真核表达的NS3蛋白有较强的特异性反应。Monoclonal antibodies against NS3 gene of CSFV was developed using recombinant NS3 （p80） protein expressed in E.coli Rosetta （DE3） as antigen. BALB/c mice was immunized with purified NS3 （pS0） protein and mouse splenic cells were fused with SP2/0 cells. Hybridoma cells were screened by ELISA, subcloned and characterized. Four hybridoma cells （2G7, 2F11, 5D2 and 6F11） secreting anti-NS3 monoclonal antibodies （McAbs） were obtained. Hybridoma cells with normal chromosome were shown to stably secret NS3 specific antibodies with various affinities. All the McAbs belong to IgG1 subtype.

关 键 词：猪瘟病毒 NS3基因 表达 蛋白纯化 单克隆抗体 

分 类 号：S852.651[农业科学—基础兽医学]