猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2的原核表达及重组蛋白ELISA应用  

作　　者：魏巍[1] 刘璇[1] 黄小国 李卫东 刘珂[3] 周斌[3] 陈溥言[3] 

机构地区：[1]南京农业大学生命科学学院,江苏南京210095 [2]常州康乐农牧有限公司,江苏常州213153 [3]南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京210095

出　　处：《畜牧与兽医》2008年第6期70-72,共3页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

摘　　要：本试验优化了含有原核质粒pET-A/D的BL21(DE3)大肠杆菌的表达条件,结果表明诱导的最佳时间和诱导剂IPTG的最佳用量分别为3h和0.1 mmol/L。在此基础上,大量诱导表达蛋白质后用Ni-IDA蛋白质层析柱进行纯化,Western-blot鉴定纯化蛋白具有抗原活性,方阵滴定法确定了重组蛋白的最佳包被量为0.5μg/孔。应用建立的ELISA方法对规模化猪场仔猪母源抗体消长进行了监测,确定了猪瘟疫苗的首免时间为42日龄。研究结果表明,ELISA方法操作简便、快速、敏感性高、特异性强等优点,适合基层兽医单位应用。

关 键 词：猪瘟 E2基因 原核表达 ELISA 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]