一种新的具有纤溶活性的N-V蛋白酶酶学性质分析  

Analysis of enzymological characterization of N-V proteinase with fibrinolytic activity

作　　者：李奇[1] 王昭[2] 张纪周[1] 洪敏[1] 

机构地区：[1]吉林大学基础医学院生物化学教研室,吉林长春130021 [2]佳木斯大学基础医学院生物化学教研室,黑龙江佳木斯154000

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》2008年第3期377-380,共4页Journal of Jilin University：Medicine Edition

基　　金：吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题(20030442)

摘　　要：目的：测定N-V蛋白酶的最适反应温度、最适反应pH值及酶促反应动力学常数（Km），并对其进行蛋白酶分类。方法：利用纤维蛋白平板法测定N-V蛋白酶最适反应温度、最适反应pH值。以卜亮氨酸-p-硝基苯胺酯（Leu-pNA）作为底物，测定N-V蛋白酶的Km值。利用卜反式环氧琥珀酰亮氨酰氨基（4-胍基）丁烷（E64）、苯甲基磺酰氟（PMSF）、1，10-邻菲哕啉、抑肽酶作为抑制剂对N-V蛋白酶的纤溶活性进行抑制作用，确定其蛋白酶分类。结果：N-V蛋白酶最适反应温度为50℃，最适反应pH值为8～9，Km值为1．97×10^-3mol·L^-1，PMSF有效抑制N-V蛋白酶的纤溶活性（P〈O．01），而E64、1，10-邻菲哕啉啉、抑肽酶对其活性均无明显抑制作用（P〉0．05）。结论：N-V蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶类。Objective To detect the optimum reaction temperature , pH, Km of N-V proteinase and determine its enzymological classification. Methods The fibrin plate method was used to determine the optimum reaction temperature and pH of N-V proteinase. The Km of N-V proteinase was detected by using Leu-pNA as substrate. E64, PMSF, zymofren and 1, 10-phenanthroline were used as inhibitors to determine proteinase classification of N-V proteinase. Results The optimum reaction temperature was 50℃, pH was 8-9, Km was 1.97×10^-3 mol·L^-1. PSMF inhibited the fibrinolytic activity of N-V proteinase （P〈0. 01）, whereas E64, zymofren and 1, 10-phenanthroline had not significantly inhibitory effects on its activity （P〉0.05）. Conclusion N-V proteinase belongs to serine proteinase.

关 键 词：N-V蛋白酶 KM值 丝氨酸内肽酶类 

分 类 号：Q556.3[生物学—生物化学]