利用正交设计优选菜心ISSR-PCR反应体系(英文)  

Orthogonal design for optimal ISSR-PCR system in flowering Chinese cabbage

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作  者:孙雪梅[1] 乔爱民[2] 孙敏[1] 桂腾琴[1] 

机构地区:[1]西南大学生命科学学院,重庆400715 [2]仲恺农业技术学院农业与园林学院,广东广州510225

出  处:《仲恺农业技术学院学报》2008年第1期1-5,共5页Journal of Zhongkai Agrotechnical College

摘  要:利用正交设计L16(44)探讨引物、Taq聚合酶、dNTPs、Mg2+对菜心ISSR-PCR反应的影响.得到适合菜心IS-SR-PCR反应的最佳体系:在25μL反应体系中含2.5μL 10×buffer,2.0 mmol/L Mg2+,0.5UTaqDNA聚合酶,0.24 mmol/L dNTPs,0.5μmol/L引物,60 ng DNA模板.Factors which affected the ISSR-PCR reaction of flowering Chinese cabbage (Brassica campestris L. ssp. Chinensis Var. utilis Tssen. et Lee. ) , such as concentrations of primer, Taq DNA polymerase, dNTPs and Mg^2+ , was studied by L16(44) orthogonal test. The optimal ISSR-PCR system for flowering Chinese cabbage was determined. In a total volume of 25 ul, containing 2.5 uL 10 × buffer, 2.0 mmol/L Mg^2 +, 0.5 units of Taq DNA polymerase, 0.24 mmol/L dNTPs, 0.50 umol/L primer and 60 ng of template DNA, clear and reproducibe DNA fragments can be obtained.

关 键 词:菜心 ISSR 正交设计 

分 类 号:S634[农业科学—蔬菜学]

 

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