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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:李姣[1] 张红[1] 张改平[1] 王爱萍[2] 易明林[1] 郅玉宝[1] 鲁琨[1] 张丽萍[1]
机构地区:[1]河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002 [2]郑州大学,郑州450001
出 处:《中国畜牧兽医》2008年第7期40-42,共3页China Animal Husbandry & Veterinary Medicine
基 金:国家自然科学基金(30571388)
摘 要:将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2蛋白基因插入增强型绿色荧光表达载体pEGFP-C1中,构建了真核表达载体pEGFP-VP2。PCR与酶切鉴定结果表明VP2基因成功插入到表达载体pEGFP-C1中。脂质体法转染COS7细胞后,荧光显微镜检测到了GFP-VP2融合蛋白的表达。用200μg/ml的G418成功筛选到了稳定表达GFP-VP2融合蛋白的细胞系,表达蛋白经镍亲和柱得到了纯化。VP2 gene of infectious bursal disease virus(IBDV) was inserted into enhanced GFP expression vector pEGFP-C1.The recombinant eukaryotic expression vector pEGFP-VP2 was constructed,and detected by endonuclease digestion and PCR,and then was ransfected to COS7 cells by lipid reagent.After infecting,green fluorescence was observed under fluorescent microscope.The results indicates that GFP-VP2 fusion protein was successfully expressed in COS7 cells.Stable expressing cells was selected by 200 μg/ml G418,and GFP-VP2 fusion protain was purified by Ni-His affinity column.
关 键 词:鸡 传染性法氏囊病病毒 VP2蛋白 真核表达 GFP融合蛋白
分 类 号:S852.659.4[农业科学—基础兽医学]
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