变性高效液相色谱技术在β地中海贫血分型诊断中的应用  

Accurate and rapid detecting β thalassemia by denaturing high-performance liquid chromatography

作　　者：张松 吴意[2] 邹汉良 王琼[2] 赵毅 朱平安 陆学东[2] 

机构地区：[1]深圳市第七人民医院检验科,518033 [2]广东医学院附属深圳市福田人民医院检验医学部

出　　处：《中华检验医学杂志》2008年第8期887-889,共3页Chinese Journal of Laboratory Medicine

摘　　要：目的探讨变性高效液相色谱技术（DHPLC）在快速诊断β地中海贫血及分型中的应用价值。方法采用外周血红细胞平均体积（MCV）、红细胞分布宽度（RDW）、红细胞脆性和Hb电泳4项指标相结合的方法筛选地中海贫血可疑标本226份。运用PCR反向斑点杂交技术（PCR-RDB）和DHPLC对226份可疑标本进行基因分型确诊。结果226份可疑静脉血标本中，经PCR-RDB和DHPLC确诊的β地中海贫血为69份，两种方法检测缺失和突变的基因型别完全一致，占地中海贫血筛查总人数的30．5％。其中CD41／CD42（-TCTT）移码突变37例（54％）；IVS-Ⅱ-654（C→T）插入序列突变12例（17％）；TATA-28（A-G）转录突变10例（15％）；CD17（A→T）无义突变5例（7％）；CD71／CD72（＋A）移码突变5例（7％）。结论DHPLC可快速、高效和准确地对β地中海贫血进行基因分型诊断。Objective To evaluate the application value of denaturing high-performance liquid chromatography （DHPLC） as a rapid gene typing tool for β thalassemia. Methods 226 suspicious samples were screened with MCV, RDW, erythrocyte fragility and hemoglobin electrophoresis. The final diagnosis of β thalassemia genotype was made by DHPLC and PCR-reverse dot blot （PCR-RDB）. Results Sixty-nine samples （30. 5% ） were eventually diagnosed as β-thalassemia by PCR-RDB. The genotyping results for β thalassemia identified by DHPLC were complete agreement with genotyping results by PCR-RDB. We found 37 cases of CD41/CD42 （-TCTF） frame shift mutation（54% ）; 12 cases of IVS-Ⅱ-654 （C→T） insertion mutation（17%）;10 cases of TATA-28 （A→G） transcription mutation （15%）;5 cases of CD17 （A→T） nonsense mutation（7%） ;5 cases of CD71/CD72 （＋A） frame shift mutation（7%） . Conclusion The DHPLC is a rapid, sensitive , efficient and highly accurate assay in the diagnosis of β-thalassemia.

关 键 词：Β地中海贫血 基因型 色谱法 高压液相 

分 类 号：R686[医药卫生—骨科学]